在現代科研領域,尤其是細胞生物學、分子生物學以及材料科學等研究方向,光學顯微鏡高分辨率成像對樣本細節的精準呈現至關重要。433802-9010-000-- 蔡司 ZEISS 無熒光鏡油 Zeiss Immersol 518 F 憑借其光學設計、穩定的化學性能以及無熒光特性,成為科研工作者實現高質量顯微觀察的可靠工具。
一、光學原理與核心技術基礎
(一)折射率匹配優化光線傳播
Zeiss Immersol 518 F 鏡油的核心光學原理基于折射率匹配。在光學顯微鏡成像中,光線從樣本經載玻片進入物鏡時,空氣(折射率約 1.00)與玻璃(載玻片和物鏡玻璃折射率約 1.52)間存在較大折射率差,會導致光線折射、散射,使部分光線偏離物鏡有效接收范圍,降低成像分辨率和亮度。而 Zeiss Immersol 518 F 鏡油的折射率精準設定為 1.518,與玻璃材質高度匹配。將其填充于載玻片與物鏡之間后,光線能夠以近乎直線的路徑傳播,顯著減少光線折射損耗,大幅提高光線進入物鏡的比例,從而增強成像的亮度與對比度,為高分辨率觀察奠定基礎 。
(二)數值孔徑提升與分辨率增強
數值孔徑(NA)是衡量物鏡聚光能力和分辨率的關鍵參數,其計算公式為 NA = n×sinθ(n 為介質折射率,θ 為物鏡孔徑角的一半)。Zeiss Immersol 518 F 鏡油通過提高介質折射率,有效提升物鏡數值孔徑。以油鏡為例,在空氣介質中其數值孔徑通常約為 0.95,使用該鏡油后,數值孔徑可提升至 1.3 - 1.4。更高的數值孔徑使物鏡能夠收集更多光線,同時根據瑞利判據(分辨率公式:d = λ / 2NA,λ 為照明光波長),在固定光源波長條件下,可分辨的最小距離 d 減小,進而實現更高分辨率成像。這使得科研人員能夠清晰觀察到細胞內線粒體嵴的細微結構、納米材料的表面形貌等精細樣本特征 。
二、化學成分與性能特性
(一)特制配方確保性能穩定
Zeiss Immersol 518 F 鏡油采用特制的碳氫化合物配方,以高純度基礎油為主體,添加了多種功能性添加劑。基礎油分子結構穩定,具有極低的揮發性,在使用過程中能有效避免因揮發導致的折射率變化,維持成像穩定性。添加劑中包含防霧劑和抗氧化劑,防霧劑可防止鏡油因環境溫度變化或樣本水分影響產生霧氣,確保長時間觀察視野清晰;抗氧化劑能抑制鏡油與空氣接觸發生氧化反應,延長鏡油使用壽命,減少因氧化對光學性能的不良影響 。
(二)物理化學性能的優異表現
在物理性能方面,該鏡油具有良好的溫度適應性,可在較寬溫度范圍(4℃ - 40℃)內保持穩定液態和光學性能。無論是在細胞培養箱內(37℃)進行實時觀察,還是對低溫保存(如 4℃)的組織切片樣本進行檢測,鏡油都不會出現凝固、變稠或折射率顯著改變的情況 。化學兼容性上,Zeiss Immersol 518 F 鏡油與常見的載玻片清潔劑(如乙醇、異丙醇)、樣本染色劑以及封片劑等化學試劑均無不良反應,不會發生溶解、沉淀或化學反應,避免對樣本和物鏡造成污染,保障實驗結果的可靠性 。
三、產品核心性能優勢
(一)極低熒光背景實現精準熒光檢測
Zeiss Immersol 518 F 鏡油的突出優勢在于其極低的熒光背景。在熒光顯微觀察中,鏡油自身的熒光特性會嚴重干擾樣本熒光信號檢測。該鏡油通過特殊的提純工藝和配方優化,在常見熒光激發波長范圍(如 488nm、561nm、640nm)下,自發熒光強度遠低于樣本熒光信號。在免疫熒光染色實驗中,能夠幫助科研人員更清晰準確地分辨目標熒光標記物,避免因鏡油熒光背景導致的假陽性結果,提高熒光信號檢測的靈敏度和準確性,為熒光定量分析提供可靠數據 。
(二)高光學均一性保障成像質量穩定
蔡司對 Zeiss Immersol 518 F 鏡油的生產有著嚴格的質量控制體系,確保產品具有高光學均一性。每一批次產品的折射率波動范圍嚴格控制在極小區間(±0.0003),保證不同區域、不同時間使用的鏡油對光線折射作用一致。在進行大視野拼接成像、長時間連續觀察實驗,或是多組平行樣本對比觀察時,這種高精度光學均一性可有效避免因鏡油光學性能差異導致的圖像變形、亮度不均等問題,使科研人員獲得穩定、高質量的顯微圖像數據 。
(三)良好的物鏡兼容性與便捷清潔性
Zeiss Immersol 518 F 鏡油與蔡司多種類型物鏡(如復消色差物鏡、平場物鏡等)具有良好的兼容性,不會腐蝕物鏡鍍膜,對物鏡的光學涂層無損害,能夠有效延長物鏡使用壽命。使用后,該鏡油可被常規有機溶劑(如二甲苯、無水乙醇)快速溶解清除,其特殊分子結構使其在物鏡表面不易殘留。科研人員只需使用干凈擦鏡紙蘸取適量溶劑輕輕擦拭,即可清潔物鏡,操作便捷,同時降低了因鏡油殘留對后續實驗造成干擾的風險 。
四、實驗應用場景與操作規范
(一)生物醫學領域應用
在細胞生物學研究中,Zeiss Immersol 518 F 鏡油配合高倍油鏡,可清晰呈現細胞內復雜亞細胞結構。例如在研究細胞凋亡過程時,能夠通過高分辨率成像觀察凋亡小體的形態變化、線粒體膜電位改變等細節 。在病理學領域,對組織切片進行 HE 染色、免疫組化染色后,使用該鏡油可更細致地分辨細胞形態、組織結構以及病變特征,為疾病診斷和病理機制研究提供清晰準確的圖像依據 。此外,在熒光標記蛋白表達檢測實驗中,其低熒光背景特性能夠精準呈現熒光蛋白的定位與表達水平,助力科研人員深入探究細胞生命活動機制 。
(二)材料科學領域應用
在材料科學研究中,Zeiss Immersol 518 F 鏡油適用于觀察納米材料、半導體器件等樣本微觀結構。對于納米顆粒的尺寸測量、表面形貌分析,以及半導體芯片中電路結構檢測,該鏡油輔助下的高分辨率光學成像可提供關鍵表征數據。例如在研究二維材料(如二硫化鉬)的層數、邊緣結構和缺陷分布時,能夠清晰呈現材料的原子級臺階和晶格結構,為材料性能研究和制備工藝優化提供直觀有效的圖像信息 。
(三)標準操作流程
使用前準備:使用 Zeiss Immersol 518 F 鏡油前,需確保載玻片和蓋玻片表面潔凈,無灰塵、污漬等雜質,避免影響成像質量。將顯微鏡物鏡切換至高倍油鏡(通常為 100×),調節載物臺高度,使物鏡接近但不接觸樣本 。
添加鏡油:使用移液槍或滴管吸取適量鏡油,滴加 1 - 2 滴于蓋玻片中央樣本區域上方,緩慢旋轉物鏡轉換器,使油鏡鏡頭浸入鏡油中,確保鏡油在物鏡與蓋玻片之間形成均勻接觸層 。
觀察與調整:通過微調細準焦螺旋進行對焦,觀察樣本成像效果。若出現亮度不均、圖像模糊等情況,可檢查鏡油層是否均勻,必要時補充鏡油或調整物鏡位置 。
使用后清潔:觀察結束后,立即使用干凈擦鏡紙蘸取二甲苯或無水乙醇,輕輕擦拭物鏡表面殘留鏡油,直至物鏡清潔干凈。清潔后,將物鏡轉離載玻片,妥善保存顯微鏡和剩余鏡油 。
(四)注意事項
避免交叉污染:不同批次或不同品牌鏡油光學性能可能存在差異,嚴禁混合使用,防止影響成像效果。使用過程中,需避免鏡油污染樣本,建議使用專用滴管或移液槍添加鏡油,且每滴加一次更換新槍頭 。
儲存條件:Zeiss Immersol 518 F 鏡油應儲存于陰涼、干燥、避光環境中,避免高溫和陽光直射,防止鏡油氧化變質或揮發。儲存溫度建議控制在 10℃ - 25℃,開封后的鏡油需密封保存,盡快使用完畢 。
安全防護:鏡油中含有的有機溶劑具有一定毒性和揮發性,操作時需在通風良好環境中進行,佩戴手套和口罩,避免皮膚接觸和吸入揮發氣體。使用后的擦鏡紙和廢棄鏡油需按照實驗室危險廢棄物處理規范進行處置 。
433802-9010-000-- 蔡司 ZEISS 無熒光鏡油 Zeiss Immersol 518 F 憑借其先進的光學技術、穩定可靠的性能以及完善的使用規范,在科研領域的光學顯微鏡成像中發揮著重要作用。科研人員通過正確掌握其原理和操作要點,能夠充分發揮該鏡油的性能優勢,獲取高質量顯微圖像數據,推動各學科領域的研究不斷深入發展。